由睾丸所产生的类固醇激素（睾酮）引起男性特征。在胚胎的第二个月末和第四个月，胎儿的睾丸就产生睾酮，由于睾酮的作用，男性胎儿的外生殖器得以发育成熟，从出生到13岁左右，男孩循环血中睾酮的含量处于低水平。在青春发育期，睾酮逐渐增高，在性成熟以后就达到了成人的水平。
睾酮与男性性发育而引起的所有男性性征变化紧密有关，这些变化包括：生长发育、肌肉发达、阴茎增大、阴毛增加、前列腺长大发育、生长胡须、喉节突出和嗓音变粗等。在70岁左右，睾丸的功能开始逐渐减退，睾酮的含量也随之降低。垂体通过分泌ICSH而调节睾丸中睾酮的产量。青春期前ICSH的值是比较低的，在性发育成熟后就逐渐升到成年人水平，在老年人，因为睾丸的功能减退的变化对垂体负反馈减少，而使ICSH增高。
在成年人，95％的睾酮由睾丸产生，肾上腺分泌少量睾酮，循环睾酮大多数与蛋白质结合，只有极少部分的男性激素在血中游离存在，并且有代谢活性。在青春前期的男孩，蛋白结合睾酮的比例要比成人大。由于睾酮分泌有节律性变化，若在规定时间采集血浆样品进行睾酮的测定值有助于获得睾酮结合蛋白的估价。成年男性（2l～45岁）。外周血浆睾酮含量为20.9±7.1nmol/L（596±202ng/d1），成年女性（20～35岁）为1.6±0.7nmol/L（46±2lng/d1）。
睾酮的含量在一天中具有昼夜间节律性变化，上午的含量最高，高峰时间在清晨4～9时，一般取血时间以晨6～9时空腹为宜。为了提高准确度，所有的患者和对照者都要采集2～3次样品（每、30分钟或连续数日采血），如果只取一次样品，那么正常值的范围就会很宽。
专家提醒：对睾酮测定结果的解释，必须根据临床表现，结合垂体促性腺激素的浓度和其他诊断措施综合分析，为确定一个异常结果，最好应重复测定。成年男性睾酮值较低可能意味着垂体或睾丸功能衰竭。
